可見分光光度計是基于物質(zhì)對特定波長可見光的吸收特性進(jìn)行分析的常用儀器，廣泛應(yīng)用于教學(xué)、常規(guī)檢測與科研實驗等領(lǐng)域。本文將系統(tǒng)介紹其操作流程，幫助使用者規(guī)范操作、獲取可靠數(shù)據(jù)。

一、操作前準(zhǔn)備

儀器檢查與開機(jī)

確認(rèn)儀器處于平穩(wěn)臺面，接通電源。打開主機(jī)電源開關(guān)，系統(tǒng)自檢后進(jìn)入主界面。預(yù)熱時間一般建議為15-30分鐘，使光源穩(wěn)定、檢測系統(tǒng)達(dá)到平衡狀態(tài)。

樣品與試劑準(zhǔn)備

根據(jù)測定標(biāo)準(zhǔn)（如GB/T261）準(zhǔn)備樣品與標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用匹配的比色皿，裝入?yún)⒈热芤海ㄍǔ榭瞻兹軇┡c待測樣品液。注入液體量適中，外壁需用擦鏡紙拭干，避免留下指紋或水漬影響透光。

二、基礎(chǔ)測定：光度測量

參數(shù)設(shè)置

在儀器主界面選擇“光度測量"模式。設(shè)定測定波長，可通過數(shù)字鍵盤直接輸入或從列表中選擇。部分儀器支持多波長同時測定，可根據(jù)需要添加多個波長點。

基線校準(zhǔn)

將裝有參比溶液的比色皿放入樣品室，關(guān)閉蓋子。執(zhí)行“調(diào)零"或“基線校正"操作，儀器將自動調(diào)整透光率為100%（吸光度為0）。此步驟可消除溶劑與比色皿本身的光吸收影響。

樣品測定

取出參比皿，放入樣品皿。點擊“測量"鍵，儀器顯示該波長下樣品的吸光度（A）、透光率（%T）及能量值。記錄數(shù)據(jù)或直接保存至儀器存儲器。

三、定量分析：建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)溶液測定

在“定量測試"模式下，選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線法（如多點線性擬合）。依次測量一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，儀器自動記錄各濃度對應(yīng)的吸光度值。

曲線擬合與驗證

測定完成后，儀器可繪制濃度-吸光度曲線，并給出擬合公式與相關(guān)系數(shù)。建議使用相關(guān)系數(shù)評估線性關(guān)系?？蓽y定1-2個驗證樣品檢驗曲線可靠性。

未知樣濃度計算

將未知樣品按相同條件處理并測定吸光度，儀器依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動計算并顯示濃度結(jié)果。

四、進(jìn)階功能應(yīng)用

光譜掃描

用于獲取樣品在一定波長范圍內(nèi)的吸收光譜。進(jìn)入“波長掃描"功能，設(shè)置起始波長、結(jié)束波長及掃描速度。

若需監(jiān)測反應(yīng)過程中吸光度隨時間的變化，可選擇“時間掃描"。設(shè)定監(jiān)測波長、時間區(qū)間與取樣間隔，啟動后儀器自動跟蹤記錄，可用于反應(yīng)速率計算。

五、數(shù)據(jù)保存與儀器維護(hù)

數(shù)據(jù)導(dǎo)出

測定結(jié)果可儲存于儀器內(nèi)置存儲器，也可通過數(shù)據(jù)接口連接電腦導(dǎo)出。部分型號支持微型打印機(jī)直接打印報告。

結(jié)束操作

測量完成后，取出比色皿并清洗干凈。關(guān)閉儀器電源，填寫使用記錄。定期清潔樣品室，避免灰塵或液體殘留影響光學(xué)系統(tǒng)。

注意事項：

比色皿需保持透光面清潔，避免劃傷。

溶液不可長時間放置于樣品室，防止揮發(fā)或腐蝕。

若儀器長期不用，建議定期通電維護(hù)。

規(guī)范的操作流程是保證分光光度計測量準(zhǔn)確性與重復(fù)性的基礎(chǔ)。使用者應(yīng)結(jié)合具體實驗要求合理選擇功能，并嚴(yán)格遵守相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行操作。